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该研究揭示了PKCη在三阴性乳腺癌转移中的关键作用，阐明其通过磷酸化YAP-Ser128激活Hippo-YAP通路并抑制AKT信号，从而促进EMT和肿瘤干细胞特性，同时发现上游开放阅读框编码的微肽可靶向降解PKCη，具有潜在治疗价值。
文献概述
本文《PKC-eta promotes breast cancer metastasis by regulating the Hippo–YAP signaling pathway》，发表于《Signal Transduction and Targeted Therapy》杂志，回顾并总结了蛋白激酶C-eta（PKCη）在三阴性乳腺癌（TNBC）转移过程中的分子机制。研究发现PKCη通过调控Hippo-YAP信号通路促进上皮-间质转化（EMT）和肿瘤干细胞特性，从而驱动肿瘤进展与远处转移，并揭示了一个进化保守的上游开放阅读框（uORF）编码的微肽可作为PKCη降解剂，激活Hippo通路并抑制YAP功能。整段通顺、有逻辑，结尾用中文句号，段落结尾使用背景知识
三阴性乳腺癌（TNBC）是一种侵袭性强、易转移且治疗选择有限的乳腺癌亚型，占所有乳腺癌病例的10%-20%。其缺乏雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2（HER2）表达，导致靶向治疗难以实施，化疗仍是主要手段，但耐药和复发率高。因此，探索驱动TNBC转移的关键信号通路对开发新疗法至关重要。
上皮-间质转化（EMT）是肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的重要生物学过程，与肿瘤干细胞（CSCs）表型密切相关，促进肿瘤起始、转移定植和治疗抵抗。Hippo-YAP信号通路是一个进化保守的通路，调控器官大小、组织稳态和癌症发展。当通路失活时，YAP/TAZ进入细胞核，与TEAD家族转录因子结合，激活促增殖和促转移基因。在多种癌症中，YAP过度活化与不良预后相关。
蛋白激酶C（PKC）家族是G蛋白偶联受体（GPCR）下游的重要效应分子，参与多种细胞功能调控。其中，PKCη属于新型PKC亚型，具有抗凋亡功能，在多种癌症中异常表达。尽管已有研究表明PKCη与乳腺癌不良预后相关，但其在TNBC转移中的具体作用机制尚不清楚。此外，上游开放阅读框（uORF）通常位于mRNA的5'UTR区，传统上被认为抑制主ORF翻译，但近年研究发现某些uORF可编码功能性微肽，参与调控蛋白稳定性与信号通路。
本研究聚焦于PKCη在TNBC转移中的功能，系统解析其对Hippo-YAP通路的调控机制，并探索uORF编码微肽的治疗潜力，为TNBC提供了新的分子靶点和干预策略。该研究填补了PKCη在Hippo通路调控中的空白，拓展了对激酶-转录共激活因子互作网络的理解，具有重要的理论与转化意义。
研究方法与实验
研究人员首先利用TCGA和METABRIC等公共数据库分析PRKCH（编码PKCη）在不同乳腺癌亚型中的表达特征，结合GSEA富集分析评估其与EMT特征的相关性。通过免疫组化（IHC）在组织芯片中验证PKCη表达与肿瘤分级、分期及亚细胞定位的关系。在功能层面，采用CRISPR/Cas9技术构建PKCη基因敲除的4T1和MDA-MB-231细胞系，进行体外迁移、侵袭、球体形成和极限稀释实验，评估其对EMT和干性的影响。动物模型方面，通过原位移植和尾静脉注射建立异种移植小鼠模型，监测肿瘤生长与肺转移情况，并进行生存分析。
为探究PKCη的分子机制，作者通过Co-IP、ELISA和分子对接分析验证PKCη与YAP的物理相互作用，并利用体外激酶实验确认PKCη对YAP-Ser128的直接磷酸化。通过亚细胞分级和免疫荧光分析YAP的定位变化，并使用环己酰亚胺追踪实验评估YAP蛋白稳定性。同时，检测了PKCη缺失对AKT-MST1-LATS1通路的影响，结合siRNA干扰和药理抑制剂处理验证信号串扰。最后，研究了uORF编码微肽uPEP2对PKCη和YAP表达的影响，在细胞和动物模型中评估其抗肿瘤和抗转移效果。关键结论与观点
研究意义与展望
本研究首次系统揭示了PKCη作为Hippo-YAP通路的上游负调控因子，在TNBC转移中发挥核心作用。通过磷酸化YAP-Ser128，PKCη不仅增强YAP稳定性，还可能阻碍LATS1介导的Ser127磷酸化，从而协同促进YAP核定位与转录活性。这一发现拓展了对Hippo通路调控网络的认识，尤其强调了PKC家族成员在该通路中的特异性功能差异。
此外，研究发现uPEP2微肽可通过降解PKCη来激活Hippo通路，显著抑制肿瘤进展与转移，为TNBC治疗提供了全新的靶向策略。相较于传统小分子激酶抑制剂，靶向蛋白降解（如PROTAC或微肽介导降解）可能更具选择性和持久效应。未来可进一步探索uPEP2的递送方式、药代动力学及其与其他疗法（如免疫治疗）的联合应用潜力。
尽管该研究机制解析深入，但仍需进一步验证PKCη在其他TNBC模型中的普适性，并探索其在肿瘤微环境中的作用。同时，uPEP2的稳定性与体内生物利用度需优化，以推动其向临床转化。总体而言，该工作为TNBC的精准治疗提供了强有力的新靶点和概念验证。
结语
本研究系统阐明了PKCη在三阴性乳腺癌转移中的关键促癌作用及其分子机制。通过整合多组学分析、基因编辑细胞模型和动物实验，研究发现PKCη在“claudin-low”亚型中高表达，并与EMT特征及不良预后显著相关。机制上，PKCη通过双重途径激活YAP：一方面直接磷酸化YAP-Ser128，增强其稳定性和核转位；另一方面抑制AKT-MST1-LATS1激酶级联，解除Hippo通路对YAP的抑制。功能实验表明，PKCη缺失显著削弱肿瘤细胞的迁移、侵袭和干性，并在小鼠模型中抑制原发肿瘤生长和肺转移。更重要的是，研究揭示了一个进化保守的uORF编码微肽uPEP2可靶向降解PKCη，从而激活Hippo通路、促进YAP降解并抑制转移。这些发现不仅拓展了对PKC家族与Hippo-YAP信号串扰的理解，也为三阴性乳腺癌的治疗提供了新的干预靶点和潜在治疗分子，具有重要的转化医学价值。
